방부력 시험법_Challenge test method (ISO & CTFA)

방부력 시험 균주 

방부력 시험에 사용되는 균주는 아래의 5종이 대표적이며, 생산라인에서 잘 오염되는 균주를 사용할 수 있음.

1) 세균 미생물 3종 

황색포도상구균(S.aureus), 대장균(E.Coli), 녹농균(P.aeruginosa)

2) 효모 (Candida albicans) 

칸디다균

3) 곰팡이균 (a. niger) 

 

방부력 시험법 

1) 균주 접종  

Sample 20g  + Microorganisms (external inoculation) 1% 

-> 샘플 20g 에 미생물 1% 를 접종한후 잘 섞어준다. (스토마커등을 사용한다) 

-> 5종을 각각 진행하며, 접종균수는 세균은 10⁷ cfu/ml, 곰팡이와 효모는 10⁶ cfu/ml 이다)

2) 생균수 확인 

생균수의 변화를 측정하는데 접종즉시/1일차/3일차/7일차/14일차/21일차/28일차 확인한다. 

-> 25c 에 계속 보관하면서 생균수를 측정한다. 

-> 주로 한천 평판 도말법을 사용 , 유효카운팅은 세균 30~300개 사이/진균 100개 이하 

-> 각 균주별 선택배지도 사용가능하며, 공통배지 사용도 가능함

E.Coli : EMB, MacConkey agar

S.aureus : VJ Agar, Baird Parker agar

P. aeruginosa : Cetrimide agar, Pseudommonas pf agar

3) 방부력 유효 기준 

- CTFA 기준은 7일차에 99.9% 감소

- USP 기준은 14일차에 99% 감소되어야 한다. 

 

예시사진) 왼_깨끗한 배지 / 오_균이 잔뜩 자란 배지